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ME-Calcium甘露醇糖类检测专用柱

发布时间: 2018-09-17 10:28   646 次浏览



ME-Calcium系列色谱柱专为高效分离制备水溶性或部分水溶性的有机化合物而设计,可用于分离糖类、有机酸、多肽和细胞代谢物中的生物有机小分子。ME-Calcium系列固定相是在低交联度(5%、8%和10%)的聚苯乙烯/二乙烯基苯(PS/DVB)颗粒(5、10 µm)表面键合磺酸基团(-SO3H),即为ME-Calcium填料;若在此填料上继续络合不同的离子则形成不同类型的填料。如络合离子为钙离子(Ca2+),则为ME-Calcium填料;如络合离子为铅离子(Pb2+),则为ME-Calcium Pb填料;如络合离子为钾离子(K+),则为ME-Calcium 填料;如络合离子为钠离子(Na+),则为ME-CalciumN填料。

                                                 

5和10 μm ME-Calcium填料电镜图



ME-Calcium色谱柱技术参数表


 


类型

ME-Calcium

ME-Calcium

ME-Calcium

ME-Calcium

ME-Calcium

基质

PS/DVB

PS/DVB

PS/DVB

PS/DVB

PS/DVB

粒径 (μm)

5, 10

5, 10

5, 10

5, 10

5, 10

交联度

5%, 8% and 10%

5%, 8% and 10%

5%, 8% and 10%

5%, 8% and 10%

5%, 8% and 10%

固定相

-SO3H

-(SO3)2Ca

-(SO3)2Pb

-SO3K

-SO3Na

pH稳定性

1 – 3

5 – 9

5 – 9

5 – 9

5 – 9

******耐压 
(psi) (1)

10% 交联度

10 μm

1,500

1,500

1,500

1,500

1,500

5 μm

1,000

1,000

1,000

1,000

1,000

8% 交联度

10 μm

1,000

1,000

1,000

1,000

1,000

5 μm

800

800

800

800

800

5% 交联度

10 μm

600

600

600

600

600

5 μm

400

400

400

400

400

推荐流动相

2.5 mM H2SO4
0.1% H3PO4

H2O

H2O

H2O

H2O

推荐流速
(mL/min)(2)

7.8x300 mm

0.4-0.8

0.4-0.8

0.4-0.8

0.4-0.8

0.4-0.8

4.6x300 mm

0.1-0.30

0.1-0.30

0.1-0.30

0.1-0.30

0.1-0.30

******耐受温度 (oC)

85

85

85

85

85


(1) 对于7.8x300 mm柱在******温度下而言,并扣除仪器的背压。
(2)
对于固定相为5 μm5%交联度树脂、规格为7.8x300 mm柱的流速是0.1 to 0.15 mL/min



ME-Calcium甘露醇糖类检测专用柱特点:

● 均匀一致的粒径确保了高分辨率和分离的高效性


● 交联度:5%、8%和10%


● 与绝大多数水系流动相容(包括纯水)


● 离子形态选择范围宽:H+、Ca2+、Pb2+、K+和Na+


● ME-Calcium柱的pH适用范围为1~3,其他类型ME-Calcium柱的pH适用范围为5~9


● 包括分析柱和制备柱


均一的粒径


 


    ME-Calcium 固定相粒径分布极窄,5 µm5.0±0.2 µm10 µm10.0 ± 0.2 µm。如此均一的粒径分布确保了赛分产品具有高的分离效率和回收率。图1表明,分离单糖试验中,ME-Calcium 色谱柱比其他品牌产品具有更高的分离效率。


 


1. 相同分离条件下,在ME-Calcium (5 µm, 8%交联度, 7.8 x 300 mm)柱和其它品牌相同规格钙柱上分离6种单糖效果对比。 


 


17.jpg

流动相:     H2O
流速:         0.60 mL/min
温度:         85
进样量:     20 μL
检测:         RI

 


 


不同离子态


 


    ME-Calcium树脂多种可选离子态使得赛分ME-Calcium系列柱可广泛用于各种不同基质中糖分子、糖醇和其他水溶性物质的优质分离。例如,树胶醛糖、核糖醇、阿糖醇很难在H柱上分离,却能在Ca柱上实现完美分离;木糖、半乳糖和甘露糖在Ca柱上是一个重叠峰,而在Pb柱上则能够依次单独流出。


 


不同离子态的选择


离子

应用

H

发酵产物、含有机酸的果汁、醇类和糖类

Ca

含大量果糖的玉米糖浆中的糖类、尤其适用于单糖、二聚糖、三聚糖、四糖及糖醇的分离

Pb

木制品中的戊糖和己糖
含有蔗糖、乳糖等的奶制品

K

蔗糖、蜜糖、玉米糖浆、甜菜糖及其他含有糖类植物产品(含有甜菜碱、三甲基氯化铵等两性离子的)
甘草膦

Na

低聚糖,尤其在含有大量无机钠离子的情况下,如蜂蜜。


 


低交联度


 


    ME-Calcium树脂的低交联度使其在流动相中可以适当的溶胀,尤其在高温条件下这是实现大多数分离任务的典型模式。这种溶胀可以优化分离时的比表面积、渗透性、容量、选择性,及改变离子强度。PS/DVB粒子的交联度越低,树脂结构就越开放,从而使更大分子量的多聚糖也有良好渗透性。图2表明,在5% ME-Calcium 柱上,聚己糖(G6)可以很好的从基质中分离,并且还能看到聚庚糖(G7)和聚辛糖(G8)的两个峰得到了分离;而在8% ME-Calcium上不但没有G7G8的峰,连G6的峰都不太明显。


 


2. 不同交联度ME-Calcium (5 µm, 7.8 x 300 mm)柱上麦芽糊精和甘油的流出曲线


 


色谱柱:      ME-Calcium Ca-NP5
流动相:      H2O
流速:          0.20 mL/min
温度:          85
进样量:      20 µL 
检测波长:   192 nm
样品:       Glucidex (100 mg/mL) and glycerol (10 mg/mL) (G3 to G7 refer to oligosaccharides)
 

 

car22.jpg


 


优异的稳定性


 


    ME-Calcium HPLC柱优良的制造工艺和先进的填装技术保证了其具有高的稳定性。即使是在升高温度的条件下,ME-Calcium树脂也能在纯水和其他水缓冲体系中保持稳定。图3表明,55下,6天内连续冲洗578倍柱体积,酸的保留时间仅改变了1%


 


3. ME-Calcium  (5 µm, 8%交联度)55下连续用5 mM H2SO4冲洗后分离有机酸色谱图


20.jpg


 

色谱柱:    4.6x 250 mm 
流动相:    5 mM H2SO4
流速:        0.30 mL/min    
温度:        55
进样量:     20 µL        
检测:         RI
样品:         1, Citric acid (50 mM); 2, Acetic acid (100 mM)

 

 


 


稳定的批间重现性


 


    由于采用了可控的表面化学修饰技术并严格监控聚合物树脂的生产过程,ME-Calcium柱具有很高的批间重现性。图4表明,不同批次间的保留时间误差在0.3%以内。


 


4. 三个不同批次ME-Calcium (10 µm, 8%交联度)柱分离有机酸色谱图


20.jpg


 

色谱柱:   7.8x300 mm         
流动相:   2.5 mM H2SO4 
流速:       0.6 mL/min           
温度:       55
进样量:    5 µL                
检测:        RI
样品:        Mixture of Citric acid, Succunic acid, Formic acid, Acetic acid


 


 
多种分离机理共同作用


 


    ME-Calcium树脂表面的抗衡离子(H+Ca2+Pb2+K+Na+)能缓和分离过程。通常,分离的过程涉及两种或两种以上的机理同时作用,包括体积排阻、离子排斥、离子交换、配体交换、反相作用及正相作用。对多糖类样品来说,体积排阻机理是主要的作用机理,如图4中寡聚糖的分离。而分离单糖时的主要机理则主要是配位效应,例如Ca型柱中分离葡萄糖的αβ-异构体。在实现蜂蜜样品的分离过程中,首要的机理为离子排斥作用,该作用使得无机钠离子通过孔隙被洗脱下来。而体积排阻和配体交换作用则依次作用于寡聚糖和单糖的分离。对于分离有机酸用的ME-Calcium H型树脂来说,反相作用和离子排阻作用均为首要机理。疏水性和pKa同时影响样品组成的保留时间。这一特性使得ME-Calcium型树脂非常适合于监测发酵过程中成分的变化。


 


 


ME-Calcium



产品名称

粒度

交联度

规格

订货号

ME-Calcium

10 µm

5%

4.6x50 mm

511331-4605

ME-Calcium

10 µm

5%

4.6x300 mm

511331-4630

ME-Calcium

10 µm

5%

7.8x50 mm

511331-7805

ME-Calcium

10 µm

5%

7.8x100 mm

511331-7810

ME-Calcium

10 µm

5%

7.8x300 mm

511331-7830

ME-Calcium

10 µm

5%

10x300 mm

511331-10030

ME-Calcium

10 µm

8%

4.6x50 mm

511331-4605

ME-Calcium

10 µm

8%

4.6x300 mm

511331-4630

ME-Calcium

10 µm

8%

7.8x50 mm

511331-7805

ME-Calcium

10 µm

8%

7.8x100 mm

511331-7810

ME-Calcium

10 µm

8%

7.8x300 mm

511331-7830

ME-Calcium

10 µm

8%

10x300 mm

511331-10030

ME-Calcium

10 µm

10%

4.6x50 mm

511331-4605

ME-Calcium

10 µm

10%

4.6x300 mm

511331-4630

ME-Calcium

10 µm

10%

7.8x50 mm

511331-7805

ME-Calcium

10 µm

10%

7.8x100 mm

511331-7810

ME-Calcium

10 µm

10%

7.8x300 mm

511331-7830

ME-Calcium

10 µm

10%

10x300 mm

511331-10030




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