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技术知识

液相色谱做反向的原理是什么?

发布时间: 2017-03-13 11:35   3146 次浏览
液相色谱仪氨基柱在含水量多的时候下是很不稳定的,也不宜在强酸的环境下使用。缓冲液则先用水/乙腈清洗再用乙腈,氨基柱其本质属于正相柱,使用氨基柱除了采用正相系统作为流动相以外,一般还采用乙腈-水作为流动相,但是要求乙腈的含量不得低于80%,含水过多的流动相对氨基柱有损害,一般尽量不要用含水过多流动相。建议用小流速的异丙醇冲洗过夜试试。


氨基柱是同时可以用于正相条件和反相条件的,这一点很多用户都已经知道。但是要注意到的是:正相溶剂和反相溶剂往往是不互溶的,对这一点的忽略可能会带给使用者一些麻烦。NH2柱是在硅胶上键合一个5碳NH2;CN柱是在硅胶上键合一个5碳CN基;NH2.CN都为两相柱。


对于新购买到的柱子,首先请注意打开分析测试说明书,了解柱子的保存溶剂。如果保存溶剂与你将要使用的流动相极性不同不会互溶,请先用异丙醇过渡。过渡过程中注意因异丙醇粘度较大,会导致柱压很高,适当调低流速即可。如果要使用的流动相中还含有缓冲盐类,建议在用分析流动相之前,先用不含缓冲盐的同比例流动相过渡,这样可避免缓冲盐在分析柱内的析出。反相条件下使用时,要特别注意控制PH值范围,PH值越低越有发生水解的危险,流动相中水的比例越高当然也越有发生水解的危险。所以,在使用后以及准备长时间放置该柱时,必要的清洗和将氨基柱保存于纯的有机溶剂中是很好的保养措施。



 
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