简介

微生物培养基是供微生物生长、繁殖、代谢的混合养料，因为微生物有很多不同的营养类型，所以多于微生物的要求也有很多不同。还有***是微生物研究的目的不同，所以培养基的种类也不同。使用的原料也各有差异。但是如果是从营养角度来分析的话，微生物培养基中一般含有微生物所必需的碳源、氮源、无机盐、生长素以及水分等。另外，培养基还应具有适宜的pH值、一定的缓冲能力、一定的氧化还原电位及合适的渗透压。
为了能够达到我们需求的目的。需要对微生物惊喜培养基配置和灭菌。那么我们应该怎么来对微生物的培养基进行配置呢？

一、首先配制溶液

向容器内加入所需水量的一部分，按照培养基的配方，称取各种原料，依次加入使其溶解，***后补足所需水分，对蛋白胨、肉膏等物质，需加热溶解，加热过程所蒸发的水分，应在全部原料溶解后加水补足。


配制固体培养基时，先将上述已配好的液体培养基煮沸，再将称好的琼脂加入，继续加热至******融化，并不断搅拌，以免琼脂糊底烧焦。


二、在调节pH值


用pH试纸(或pH电位计、氢离子浓度比色计)测试培养基的pH值，如不符合需要，可用10%HCl或10%NaOH进行调节，直到调节到配方要求的pH值为止。


三、然后过滤


用滤纸、纱布或棉花趁热将已配好的培养基过滤.用纱布过滤时，******折叠成六层，用滤纸过滤时，可将滤纸折叠成瓦棱形，铺在漏斗上过滤。


四、在分装


已过滤的培养基应进行分装.如果要制作斜面培养基，须将培养基分装于试管中。如果要制作平板培养基或液体、半固体培养基，则须将培养基分装于锥形瓶内。分装时，一手捏松弹簧夹，使培养基流出，另一只手握住几支试管或锥形瓶，依次接取培养基。分装时，注意不要使培养基粘附管口或瓶口，以免浸湿棉塞引起杂菌污染。装入试管的培养基量，视试管和锥形瓶的大小及需要而定.一般制作斜面培养基时，每只15×150毫米的试管，约装3～4毫升(1/4～1/3试管高度)，如制作深层培养基，每只20×220毫米的试管约装12～15毫升。每只锥形瓶装入的培养基，一般以其容积的一半为宜。


五、加棉塞


分装完毕后，需要用棉塞堵住管口或瓶口。堵棉塞的主要目的是过滤空气，避免污染。棉塞应采用普通新鲜、干燥的棉花制作，不要用脱脂棉，以免因脱脂棉吸水使棉塞无法使用。制作棉塞时，要根据棉塞大小将棉花铺展成适当厚度，揪取手掌心大小一块，铺在左手拇指与食指圈成的圆孔中，用右手食指插入棉花中部，同时左手食指与姆指稍稍紧握，***会形成1个长棒形的棉塞.棉塞作成后，应迅速塞入管口或瓶口中，棉塞应紧贴内壁不留缝隙，以防空气中微生物沿皱折侵入。棉塞不要过紧过松，塞好后，以手提棉塞、管、瓶不下落为合适。棉塞的2/3应在管内或瓶内，上端露出少许棉花便于拔取。塞好棉塞的试管和锥形瓶应盖上厚纸用绳捆札，准备灭菌。


六、制作斜面培养基和平板培养基


培养基灭菌后，如制作斜面培养基和平板培养基，须趁培养基未凝固时进行。


(1)制作斜面培养基。在实验台上放1支长0.5～1米左右的木条，厚度为1厘米左右，将试管头部枕在木条上，使管内培养基自然倾斜，凝固后即成斜面培养基。


(2)制作平板培养基。将刚刚灭过菌的盛有培养基的锥形瓶和培养皿放在实验台上，点燃酒精灯，右手托起锥形瓶瓶底，左手拔下棉塞，将瓶口在酒精灯上稍加灼烧，左手打开培养皿盖，右手迅速将培养基倒入培养皿中，每皿约倒入10毫升，以铺满皿底为度.铺放培养基后放置15分钟左右，待培养基凝固后，再5个培养皿一叠，倒置过来，平放在恒温箱里，24小时后检查，如培养基末长杂菌，即可用来培养微生物。