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技术知识

液相色谱柱常见问题

发布时间: 2016-11-14 10:38   3957 次浏览

新C18柱的活化及应用
   饭相色谱柱也叫C18色谱柱。在化学分析行业中得到广泛的应用。
    色谱柱的活化,说白了***是一个平衡的过程。不光是流动相要平衡,。有些时候我们还得对要测试的样品对新柱子进行平衡。还有,测试分子量很高的多肽更为重要,因为分子量高的物质扩散速度很慢,平衡的话时间也相对比较长,平衡的方式比较简单,样品多进几次,等到峰的面积和时间稳定在进行正式进样测试。
  假如是要加速平衡的时间,那***直接把前面要测试的样品浓度加大或者不等洗脱完毕,连续多进样多针,使用要测试的物质对新柱进行平衡,***能加快平衡时间了。
分子量多肽不高的话 我们一般选择C18色谱柱***能很好的测定。也有用离子交换柱,亲水作用色谱柱,水性C18色谱柱等。、

2、氨基柱柱效的恢复
氨基柱在进酸性样品时,很伤柱子,如使用一段时间后,柱效降低,峰形改变,如何恢复?
氨基柱测酸性样品,应该是用氨基柱的HILIC模式。酸的存在可能会使略带负电荷的氨基官能团质子化,导致使用一段时间后对于某些类的分析物保留性质有所改变或表现在柱效下降。
液相色谱柱

建议:用5-10倍的柱体积的含0.5-1.0%NH3的乙腈-水(50:50)溶液冲洗该柱(冲洗后当然要再用不含碱的流动相洗去多余氨),之后再进行分析这类酸性分析物时建议在流动相中略微添加少许氨如0.1%。
3、色谱柱技术
色谱柱技术包括填料技术和装柱技术,填料技术自不待言,填料的好坏对色谱柱分离性能和选择性有决定性影响。装柱技术也没有想象中的这么简单,不同固定相、不同粒径、不同柱管内径和长度,装柱工艺都有所不同,要装出紧密、稳定、均一的柱床,更多是一门艺术,需要经验积累。
液相色谱柱装填实际上是有一定技巧和程序,可能还有一些运气。一般使用高压匀浆方法装填。也***是能让填料在溶剂内均匀地悬浮。然后用瞬间高压压实,这实际上用到了不同比例的匀浆液体,和合适的压力。压力太大,颗粒破碎,压力太小,塔板数少。同时压力需要稳定,不然分布不均,拖尾严重。同时还有头上平整程度。套上套,***可以用了。

国内和国外相比,色谱柱的差距在于:国内公司以前都不会自己开发填料,一般买国外现成填料装柱,买到的填料质量控制权不在自己手里。另外因为装柱历史短,经验积累少,装柱工艺也没有******达到国外水平。另外,对色谱柱性能很关键的基础材料-----裸硅胶,国产的还不过关,在纯度、粒径和孔径的均一性方面和国外产品相比,差距很大。


4、色谱柱的清洗和保护

  色谱柱如果被污染了。***把污染的地方取出然后装上一些填料。因为如果你把色谱柱脏的地方挂掉了。那么微观的理论塔板数***少了。如果你刮的不多的话,仅仅是看起来的表明层次。也许***是刮的脏污,所以你把问题解决了。但是今后还是会遇见相同的问题。再刮或者不小心刮的话可能会影响柱子的分析效果,。成都摩尔科学仪器有限公司提醒******还是装一个预装柱

一般工作完毕之后把色谱柱取下来的时候我们需要做什么?

     答:对于一般的反相色谱柱,我们把他洗干净之后放到纯甲醇里面。然后用东西把柱子的两头都赛紧,避免里面的物质挥发。不需要做太多的其他保护



 
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