通常情况下，我们所使用的液相色谱柱在长时间使用后会出现柱效降低，分离度变差的情况。这时，我们需要对色谱柱进行再生。

再生

      对于常用的反相色谱柱柱效降低需要再生时，建议按照以下流程冲洗：

1、20CV 水:乙腈=95%:5%

2、20CV 乙腈

3、5CV 异丙醇

4、20CV 正己烷

5、20CV 乙腈

6、20CV 水:乙腈=95%:5%

7、所使用的流动相重新平衡色谱柱。

      学会了色谱柱的再生，我们也得了解如何在实验过程中保护色谱柱。首先，我们需要了解色谱柱的损坏来源于哪些方面。

1、泵头密封圈磨损。

2、进样阀转子密封圈磨损。

3、缓冲盐的析出。

4、样品中的复杂易吸附基质组分。

     这些问题大多会造成色谱柱背压升高。

预防

      为了降低色谱柱损伤问题，建议在使用色谱柱时做一些预防措施。

1、在液相系统中加入在线过滤器

     在线过滤器的内部颗粒空隙一般为0.5μm，对于UHPLC会选择0.2μm空隙的在线过滤器。这个空隙尺寸接近或略小于柱头的筛板尺寸。所以，在线过滤器可以有效地阻隔来自样品、泵头密封垫。进样阀转子密封垫的颗粒物，乙方柱头过滤筛板堵塞。

2、在柱子前端使用保护柱

     保护柱有很多种，通用型、一体式、卡套式均为与分析柱固定相相同的10-20mm的小柱子。因其具有与分析柱相同的内部填料，所以保护住不仅可以阻隔颗粒物，还可以阻隔易吸附的样品基质组分。

3、对样品进行净化处理

     常用的净化手段是过滤，包括0.45μm、0.22μm微孔滤膜等。

保存
     实验结束后，色谱柱的合理保存也是保护色谱柱的关键，同时也是影响色谱柱使用寿命的关键。

1、短期保存

     应保存在***接近常用的流动相条件下，并且移除系统中的缓冲盐、酸等。

2、长期保存

     将色谱柱按照说明书保存在对应的溶剂中，并且将色谱柱从系统中去下，两头 用堵头密封。