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HP-Diol色谱柱使用说明
HP-Diol键合固定相采用独特的创新设计，以高纯度具有良好机械稳定性的硅胶为基质，通过采用高纯度键合试剂，很大限度实现单层官能团覆盖和******的残余硅醇基封尾，含碳量可高达8.8%。该填料为均一的球形颗粒，孔径为80 Å和120 Å，比表面积300m2/g。1,2-二羟基丙醚键合相的极性特征对于极性化合物有着较强的保留。通过运用独有的匀浆装填技术装填得到的HP-Diol柱柱床密度均一稳定，因此可******具有很好的柱效。HP-Diol柱一般用于多肽、蛋白和极性药物分子等分离。此外，HP-Diol柱还可以体积排阻机理用于生物分离过程中。
HP-Diol柱使用的是被******覆盖的键合硅胶填料，因此具有******的化学稳定性，特别适用于许多分析物的确认。通过严格控制单分子层形成以及封尾的化学反应条件，可确保柱与柱之间有着******的重现性。
右图是对4.6 x 250 mm HP-Diol柱进行测试得到的色谱图。
Column: HP-Diol (5μm, 120 Å, 4.6×
Mobile phase: Hexane:
Ethanol = 80:20（v/v ）
Flow rate: 1.0 mL/min
Column temperature: Ambient (
Detecter (UV): 254 nm
Injection volume: 1.0 μL
Sample: 1. Anisole
2. Phenol
3. 4-Nitrophenol
HP-Diol柱通常在高压下运行。如果管路连接不紧，将会导致有机溶剂和注入样品的泄漏，从而对操作人员的健康产生影响。一旦发生泄漏，应佩戴适当的手套进行处理。另外当打开色谱柱时还应采取适当的保护措施，以防止微小的硅胶颗粒进入呼吸道。
新的HP-Diol柱中的液相是QC流动相。在储存和运输过程中，硅胶填料可能会干涸。这时推荐用10-20倍柱体积的纯乙醇冲洗以活化色谱柱。接着可用用户自己选择的流动相冲洗色谱柱。流速由0.1mL/min逐渐升至所需的操作条件，直至基线稳定为止。如果柱压和基线波动较大，这可能是气泡进入了色谱柱中。这时可用较高流速冲洗色谱柱2-5分钟，例如4.6x150mm的色谱柱可采用流速2mL/min。
为了避免色谱柱的堵塞，所有样品和溶剂，包括缓冲溶液在内，都必须在使用前用0.45mm或0.2mm的滤膜过滤。HP-Diol键合固定相与许多溶剂相容，包括非极性溶剂、极性有机溶剂、水、缓冲液或有机试剂与水的混合物（如甲醇或乙腈的水溶液等）。流动相在使用前需要脱气。一个简单的脱气方法是将流动相在由水泵形成的真空下超声5min。
pH 避免在pH低于2或高于9的条件下使用HP-Cyano柱。较高的pH会溶解硅胶，从而使部分或全部的氰丙基链从硅胶表面脱落，引起分离效率的降低和保留时间的改变。为了获得很好的分离效果和延长柱的使用寿命，请尽量使用pH在2-8范围内的流动相。
压力 尽管HP-Diol柱可在高至5000psi的压力下使用，但正常的操作压力应当低于3000psi。长时间在高压下运行会损坏色谱柱和输液泵。由于压力来源于流速，因此流速将受制于系统所能承受的压力。一般而言，柱压会随着色谱柱使用时间的增加而逐渐增加。压力突然增加预示色谱柱入口端的筛板发生了堵塞。在这种情况下，建议将色谱柱反接后用适宜的溶剂进行冲洗。
温度 操作温度为60 oC。长时间在高温（>75oC）下操作也会损坏色谱柱，这种情形在高的pH（>8.5）条件下特别突出。
储藏 长期不用时，请不要让水或缓冲液存留在色谱柱中。在替代缓冲液时，请用至少20-30倍柱体积的50%甲醇（或乙腈）水溶液冲洗色谱柱，再用20-30倍柱体积的纯有机溶剂如乙腈等进行冲洗。每根色谱柱在运输过程中均会附有两个可拆卸的堵头。为了防止柱床干涸，请用堵头塞紧色谱柱的两端。
Sepax HP-Diol产品规格
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ID x Length |
Particle size |
Pore size |
P/N |
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2.1x150mm |
3 mm |
120 Å |
116423-2115 |
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2.1x100mm |
3 mm |
120 Å |
116423-2110 |
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2.1x50mm |
3 mm |
120 Å |
116423-2105 |
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2.1x30mm |
3 mm |
120 Å |
116423-2103 |
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4.6x250mm |
3 mm |
120 Å |
116423-4625 |
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4.6x150mm |
3 mm |
120 Å |
116423-4615 |
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4.6x100mm |
3 mm |
120 Å |
116423-4610 |
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4.6x50mm |
3 mm |
120 Å |
116423-4605 |
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2.1x250mm |
5 mm |
120 Å |
116425-2125 |
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2.1x150mm |
5 mm |
120 Å |
116425-2115 |
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2.1x100mm |
5 mm |
120 Å |
116425-2110 |
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2.1x50mm |
5 mm |
120 Å |
116425-2105 |
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2.1x30mm |
5 mm |
120 Å |
116425-2103 |
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4.6x250mm |
5 mm |
120 Å |
116425-4625 |
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4.6x150mm |
5 mm |
120 Å |
116425-4615 |
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4.6x100mm |
5 mm |
120 Å |
116425-4610 |
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4.6x50mm |
5 mm |
120 Å |
116425-4605 |
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7.8x250mm |
5 mm |
120 Å |
116425-7825 |
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10.0x250mm |
5 mm |
120 Å |
116425-10025 |
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21.2x250mm |
5 mm |
120 Å |
116425-21225 |
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21.2x150mm |
5 mm |
120 Å |
116425-21215 |
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21.2x50mm |
5 mm |
120 Å |
116425-21205 |
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