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技术知识

液相色谱柱的类型和使用方法

发布时间: 2018-04-27 17:52   454 次浏览

液相色谱柱根据功能分为HPLC和UHPLC、UPLC柱,根据内径大小又有常规分析柱,、窄径柱和毛细管柱的类型区别,其中应用广泛的液质联用仪就是用的窄径柱。因为分析类的仪器主要致力于对样品成分的判断,就需要能够准确分离少量样品的内径较小的色谱柱。而内径孔大的色谱柱用于进样量大的成品纯化和分离。

类型特点决定使用范围,虽然高效液相色谱柱已经有了很大的发展和先进的技术含量,普通的HPLC柱仍然具有用武之地,这是要与相对应的色谱柱匹配的,只有有效的合作才能实现二者******化的优势。

不同色谱柱填充物不同,作用和使用范围也不尽相同,总体来说填充物的粒径变小让色谱柱的高效分离性能发挥出来。但也不能一味追求小粒径,小粒径不代表样品通过色谱柱的行径窄小,也不代表就能将色谱仪的效用发挥******,一切都是需要相互匹配。

类型不同的色谱柱使用方法是完全一样的,使用前确定好流动相,对样品进行预处理或者不便处理的就要使用保护柱,虽然会在一些程度上影响***后的效果,但是保护柱带来的影响远远低于允许出现误差的范围。

使用结束一定要注意色谱柱的清洗保存,用缓冲溶液进行在线冲洗,注意柱中填充物的稳定性。冲洗结束完全浸泡在合适的溶剂里,防止它受到空气、水的污染。理论上,合理规范保存的色谱柱能够使用两年之久。

如果发现色谱柱的效果大不如前,就试一下看是否因为内部污染造成。尝试进行在线稀硝酸冲洗,或者将其中的零部件拆下进行分别清洗。也可以试着将里面的填充物取下换上新的。如果这些办法都不可行,就只有一个方法——更换新的色谱柱。

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