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乳糖专用柱

发布时间: 2018-04-04 11:13   521 次浏览

       乳糖专用柱

    

     乳糖专用柱Lac-Amino使用高纯度键合试剂在硅胶上键合氨基基团而得到。在药典色谱条件下的分离过程中,对乳糖和蔗糖的检测,分离度完全满足药典要求,以乳糖峰计算理论塔板数均在8000以上,远远高于药典规定的要求。


色谱柱:

Lac-Amino,5 μm,120 Å,4.6×300 mm

流动相:ACN: H2O= 70 : 30 (v/v)              

流速:1.0 mL/min

柱温:45oC

检测:示差(40 ℃ )

样品:系统适用性溶液(1.0 mg/mL乳糖+1.0mg/mL蔗糖)

进样量:10 μL


名称
保留时间
面积
拖尾因子
塔板数
分离度
蔗糖
10.93
84432
1.26
12213

乳糖
13.21
49633
1.18
9011
4.77

乳糖专用柱特点:


1. 乳糖专用柱 Lac-Amino 填料为均一的球形颗粒,******限度实现单层官能团覆盖,确保良好的峰形。

2. 通过严格控制的表面化学修饰条件,确保柱与柱之间有着可靠的重现性。

3. 运用独有的装填技术得到的Lac-Amino柱床密度均一稳定,因此可保证具有******的柱效。

4.符合药典对于色谱柱基质的要求,完全满足药典对于样品检测的分离要求。

乳糖专用柱产品应用:


2015版《中国药典》一部——乳糖【含量测定】项下乳糖的测定


乳糖专用柱订购信息:

色谱柱
规格(mm x mm)
粒度
孔径
订货号
4.6x300
5 μm
120 Å
Z00008-4630
4.6x50
5 μm
120 Å
Z00008-4605

乳糖专用柱色谱柱信息

成都摩尔科学仪器有限公司提供的赛分乳糖专用柱Lac-Amino键合相是以高纯度 具有良好机械稳定性的硅胶为基质,通过使用高纯 度键合试剂在硅胶上键合氨基基团而得到,含碳量 4.0%。该填料为均一的球形颗粒,孔径 120 ,比 表面积 300 m2 /g。该键合相采用独特的创新设计, 可******限度实现单层官能团覆盖。通过严格控制的 合成反应条件,可确保柱与柱之间有着可靠的重现 性。通过运用独有的匀浆装填技术装填得到的 Lac-Amino 柱床密度均一稳定,因此可保证具有*** 高的柱效。 Lac-Amino 柱为氨基键合硅胶色谱柱,特别推 荐用于 2015 版《中国药典》四部中辅料乳糖的检 测。 图 1 是按照 2015 版《中国药典》四部——乳 糖含量测定项下的色谱条件,使用 Lac-Amino 4.6×300 mm 色谱柱对乳糖和蔗糖对照品溶液进行 测试的图谱。

安全注意事项

乳糖专用柱通常在高压下运行。如果管路连接 不紧,将会导致有机溶剂和注入样品的泄漏,从而 对操作人员的健康产生影响。一旦发生泄漏,应佩 戴适当的手套进行处理。另外当打开色谱柱时还应 采取适当的保护措施,以防止微小的硅胶颗粒进入 呼吸道。

图 1:蔗糖和乳糖对照品测试图谱


色谱柱安装与操作

色谱柱在运输过程中或在没有使用时,它的两 端总是用堵头进行密封。当将色谱柱接入色谱仪器 系统时,首先移去两端的堵头。请注意将流动相流 动的方向与柱上标记的方向保持一致。除非出于特 殊考虑,例如为了清除堵在色谱柱入口端的脏污等 而需要将色谱柱反接以进行冲洗时,建议用户在接 上色谱柱时一定要遵循柱上标记的方向。由于色谱 柱的连接是整个色谱操作过程的一部分,如果密封 卡套过紧,或安装不合适,或者密封卡套与色谱柱 端口不匹配,都有可能导致溶液的泄漏。请按照下 面步骤将色谱柱与密封卡套相连接,从而将色谱柱 接入 HPLC 系统: (a)******次使用的管线,请依次将管线接头和密 封卡套装在外径 1/16”的管线上。密封卡套的宽口 端应朝向管线接头。 (b)将管线紧紧插入色谱柱的接口,向前滑动密 封卡套和管线接头,并使管线接头的螺纹与色谱柱 端口的螺纹相互衔接,然后拧紧管线接头。如果管 线为高分子材料,请转到步骤(d);如果是金属管 线,请继续(c)。 (c)在用力将管线压入柱端接口之后,用 1/4”扳手 将已拧紧的螺帽再进一步紧固。 (d)对色谱柱的另一端采用上述方法进行操作。

新的 Lac-Amino 色谱柱保存在纯乙腈中。在储 存和运输过程中,硅胶填料可能会干涸,这时推荐 用 5~10 倍柱体积的纯乙腈对色谱柱进行低流速冲 洗。接着可用 2015 版《中国药典》四部乳糖检测 要求的流动相 70 %乙腈水溶液平衡色谱柱,直至基 线稳定为止。如果柱压和基线波动较大,这可能是 气泡进入了色谱柱中。这时可用较高流速(1.0 mL/min)冲洗色谱柱 2~5 min。

样品与流动相 为了避免色谱柱的堵塞,所有样品和溶剂,都 必须在使用前用 0.45 μm 或 0.22 μm 的滤膜过滤。 乳糖专用柱专为 2015 版《中国药典》四部中辅料 乳糖的检测而设计,采用药典规定的流动相系统进 行检测。流动相在使用前需要脱气,一个简单的脱 气方法是将流动相在由水泵形成的真空下超声 5 min。

色谱柱的保养

pH 避免在 pH 低于 2.0 或高于 8.5 的条件下使用 色谱柱。高的 pH 会溶解硅胶,从而使部分或全部 的键合相从硅胶表面脱落,引起分离效率的降低和 保留时间的改变。为了获得******的分离效果和延长 柱的使用寿命,请尽量使用 pH 在 2.0~7.5 范围内的 流动相。

压力 尽管乳糖专用柱可在高至 4000 psi 的压力下 使用,但正常的操作压力应当低于 2500 psi。长时 间在高压下运行会损坏色谱柱和输液泵。由于压力 来源于流速,因此******流速将受制于系统所能承受 的压力。一般而言,柱压会随着色谱柱使用时间的 增加而逐渐增加。压力突然增加预示色谱柱入口端 的筛板发生了堵塞。在这种情况下,建议将色谱柱 反接后用适宜的溶剂进行冲洗。

温度 ******操作温度为 60°C。长时间在高温(>75 °C)下操作会损坏色谱柱,这种情形在高的 pH (>8.5)条件下特别突出。 色谱柱清洗 多次使用后某些样品中的杂质可能 会吸附到入口筛板或填料上。当积累到一定程度时 会出现压力升高并伴随峰形展宽的现象。出现这种 情况时,用推荐的保存溶剂纯乙腈低流速活化冲洗 色谱柱即可。 储藏 长期不用时,请用至少 20~30 倍柱体积的纯 乙腈冲洗色谱柱并保存。每根色谱柱在运输过程中 均会附有两个可拆卸的堵头。为了防止柱床干涸, 请用堵头塞紧色谱柱的两端,常温储存即可。






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